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http://www.bdtd.uerj.br/handle/1/20870
Tipo do documento: | Tese |
Título: | Potencial de virulência de amostras de Corynebacterium spp. isoladas de pacientes hospitalizados |
Título(s) alternativo(s): | Virulence potential of Corynebacterium spp. isolated from hospitalized patients |
Autor: | Heggendornn, Lorraine Herdy ![]() |
Primeiro orientador: | Sant'Anna, Louisy Sanches dos Santos |
Primeiro coorientador: | Póvoa, Helvécio Cardoso Corrêa |
Primeiro membro da banca: | Guaraldi, Ana Luíza de Mattos |
Segundo membro da banca: | Ribeiro, Paula Marcele Afonso Pereira |
Terceiro membro da banca: | Longo, Luís Guilherme de Araújo |
Quarto membro da banca: | Souza, Cassius de |
Resumo: | Nas últimas décadas, as corinebactérias não-diftéricas emergiram como verdadeiros patógenos de infecções nosocomiais e o padrão de resistência destes microrganismos a múltiplas drogas têm sido enfatizado. Entretanto, os mecanismos de virulência destes patógenos não se encontram bem elucidados. Nesta perspectiva, o presente trabalho teve como objetivo investigar o potencial de virulência de cepas de Corynebacterium spp. isoladas de material clínico humano e caracterizar os determinantes genéticos envolvidos com fenótipo de Metalo-Beta-Lactamase (MBL) positivo nas amostras bacterianas estudadas. Neste estudo, foram utilizadas amostras clínicas das espécies Corynebacterium amycolatum (3 cepas), Corynebacterium accolens (4 cepas), Corynebacterium minutissimum (1 cepa) e Corynebacterium falsenii (1 cepa). Os ensaios de invasão foram realizados com macrófagos U-937 no intervalo de 3 e 6 horas. O nematódeo Caenorhabditis elegans foi empregado como modelo in vivo para o ensaio de virulência. Amostras de Corynebacterium spp. fenotipicamente produtoras de MBL foram submetidas a técnica da reação em cadeia da polimerase, para a identificação do determinante genético responsável pela resistência bacteriana. Todas as amostras foram capazes de aderir aos macrófagos U-937. Todas as cepas de Corynebacterium spp. causaram declínio da curva de sobrevivência de C. elegans, quando comparadas à curva de sobrevivência dos nematódeos expostos à cepa controle. Quanto à morfologia e ao desenvolvimento dos nematódeos infectados por Corynebacterium spp., 100,0% das cepas apresentaram deformação da região anal (fenótipo Dar) e distensão abdominal em C. elegans. O fenótipo “Worm bagging” foi observado em todas as amostras testadas. O gene bla, que codifica uma beta-lactamase classe A, foi detectado em cepas de C. amycolatum multirresistentes. Por fim, as amostras bla gene positivas foram encaminhadas para sequenciamento e o resultado depositado no GenBank. Em conclusão, o estudo destaca a relevância de Corynebacterium spp. como um patógeno nosocomial multirresistente. De acordo com o conhecimento atual, esta é a primeira identificação de C. amycolatum resistente ao imipenem, evidenciando a produção de MBL e gene bla positivo. Além disso, os resultados mostraram que a interação entre o nematódeo e Corynebacterium spp. resultou em alterações morfológicas que podem fornecer conhecimentos sobre aspectos da patogenicidade bacteriana e mecanismos subjacentes aos processos fisiológicos em humanos. Dessa forma, sugere-se que os programas de vigilância médica incluam estratégias de controle para diminuir os potenciais fatores de risco de infecções nosocomiais por Corynebacterium spp |
Abstract: | In the last decades, non-diphtheritic corynebacteria have emerged as true pathogens of nosocomial infections and the pattern of resistance of these microorganisms to multiple drugs has been emphasized. However, the virulence mechanisms of these pathogens are not well understood. In this perspective, the present work aimed to investigate the virulence potential of Corynebacterium spp. isolated from human clinical material and to characterize the genetic determinants involved with a Metallo-Beta-Lactamase (MBL) phenotype in our bacterial strains. In this study, clinical strains of Corynebacteirum amycolatum (3 strains), Corynebacterium accolens (4 strains), Corynebacterium minutissimum (1 strain) and Corynebacterium falsenii (1 strain) were studied. Assays of adherence and invasion to the U-397 macrophage lineage were performed at 3 and 6 hours. The nematode Caenorhabditis elegans was used as an in vivo model for the virulence assay. Corynebacterium spp. phenotypically producing MBL were submitted to the polymerase chain reaction technique to identify the genetic determinant responsible for bacterial resistance. All samples showed adherence to the macrophage lineage U-937. All strains of Corynebacterium spp. caused a decline in the survival curve of C. elegans, when compared to the survival curve of nematodes exposed to the control strain. Regarding the morphology and development of the nematodes infected by Corynebacterium spp., 100.0% of the strains caused deformation of the anal region (Dar phenotype) and abdominal distension. The “worm bagging” phenotype was observed for all strains tested. The bla gene, which encodes a class A beta-lactamase, was detected in multidrug-resistant strains of C. amycolatum. In conclusion, the study highlights the relevance of Corynebacterium spp. as a multidrug-resistant nosocomial pathogen. To the best of our knowledge, this is the first identification of imipenem-resistant C. amycolatum, showing the production of MBL and positive for bla gene. Finally, the bla gene was sequenced and the result deposited in GenBank. Furthermore, the results showed interaction between the nematode and Corynebacterium spp. resulted in morphological changes that may provide insights into aspects of bacterial pathogenicity and mechanisms underlying physiological processes in humans. Thus, it is suggested that medical surveillance programs include control strategies to reduce potential risk factors for nosocomial infections by Corynebacterium spp |
Palavras-chave: | Virulence potential Cellular interaction Metallo-beta-lactamase Corynebacterium spp. – Patogenicidade Caenorhabditis elegans Resistência Microbiana a Medicamentos – Genética Infecção hospitalar Virulência Macrófagos U-937 Metalo-Beta-Lactamase |
Área(s) do CNPq: | CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA |
Idioma: | por |
País: | Brasil |
Instituição: | Universidade do Estado do Rio de Janeiro |
Sigla da instituição: | UERJ |
Departamento: | Centro Biomédico::Faculdade de Ciências Médicas |
Programa: | Programa de Pós-Graduação em Microbiologia |
Citação: | HEGGENDORNN, Lorraine Herdy. Potencial de virulência de amostras de Corynebacterium spp. isoladas de pacientes hospitalizados. 2022. 92 f. Tese (Doutorado em Microbiologia) - Faculdade de Ciências Médicas, Universidade do Estado do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, 2022. |
Tipo de acesso: | Acesso Aberto |
URI: | http://www.bdtd.uerj.br/handle/1/20870 |
Data de defesa: | 28-Set-2022 |
Aparece nas coleções: | Doutorado em Microbiologia |
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